【測定原理】

已烯雌酚ELISA定量試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的殘留物已烯雌酚將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭已烯雌酚抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物已烯雌酚的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)殘留物已烯雌酚的含量。

【試劑盒技術(shù)指標(biāo)】

中文名稱：已烯雌酚ELISA定量試劑盒  

產(chǎn)品規(guī)格：96孔/盒

品    牌：臻科研

檢測方法：酶聯(lián)免疫法

檢測時間：45min

產(chǎn)品優(yōu)勢：靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好

用   途 ：科研實驗專用，不得用于臨床診斷。

貨期供應(yīng)：2個工作日

特別說明：產(chǎn)品保證質(zhì)量有任何質(zhì)量問題包退換，歡迎大家前來選購。

存   儲 ：2～8℃保鮮冷藏，切勿冷凍

保質(zhì)期  ：12個月;生產(chǎn)日期、有效期、生產(chǎn)批號見外包裝。

【試劑盒組成】

1、 微量測試孔：1×96孔板（12條×8孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品溶液×6瓶：（1ml/瓶）

3、 高濃度標(biāo)準(zhǔn)品：×1瓶：（1ml/瓶）

4、 酶標(biāo)記物    7ml………………………紅色帽

5、 抗體工作液  7ml ………………………綠色帽

6、 底物A液    7ml ………………………棕色帽

7、 底物B液    7ml  ……………………黑色帽

8、 終  止  液  7ml  ……………………黃色帽

9、 20X濃縮洗滌液40 ml  ………………白色帽

10、 2X 濃縮復(fù)溶液   50ml ·………………藍(lán)色帽 

【所用儀器、試劑】

具備的儀器：酶標(biāo)儀、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）、氮 吹儀、刻度移液管

微量移液器：單道 20μl～200μl、單道100μl～1000μl多道 30～300 μl

試      劑： 甲醇、正己烷等（具體見說明書）

【產(chǎn)品展示】

【操作步驟】

1、 將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置室溫（20-25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2、 按板架及需要取出微孔條，將不用的微孔放入自封袋，保存于2-8℃。

3、 編號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

4、 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50µl /孔，然后加酶標(biāo)記物50μl/孔，再加入抗體工作液50µl/孔。輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板，25℃環(huán)境反應(yīng)30min。

5、 取出用洗滌液按每孔250μl洗板4-5次，每次浸泡15-30秒，拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

6、 顯色：每孔加入底物液A液50µl再加B液50µl，輕輕振蕩混勻，25℃環(huán)境避光顯色15min。

7、 測定：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測定吸光度值（OD值）。

【注意事項】

1、 使用前將所有試劑溫度回升至室溫20-25℃。試劑及標(biāo)本沒有回到室溫（20-25℃）會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

2、 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會伴隨著出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3、 混合要均勻，否則會出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。

4、 反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。

5、 不要使用過了有效日期的試劑盒，稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號的盒中試劑。

6、 不用的微孔板放進(jìn)自封袋密封；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

7、 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個單位（A_450nm< 0.5 ）時，表示試劑可能變質(zhì)。

8、 該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。